动物实验

  • 肿瘤免疫验证

肿瘤与免疫是目前药物研发的非常重要的方向,我们可以提供:

1、T细胞激活检测;

2、T细胞基因编辑服务;

3、CAR-T细胞体内/体外检测;

4、原代肿瘤细胞药物测试;

1. T细胞激活检测
通过使用CD3和CD28对细胞进行激活,并加入其他的靶点抗体PD-L1等,检测T细胞激活的情况和IFN产生浓度,并通过流式检测CD69等指标的上升的情况。项目可以对临床来源的T细胞进行检测,评估个体的T细胞的抑制或者激活的能力。

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T细胞激活与IFN-γ产生


2. T细胞基因编辑服务


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Nat Protoc. 2019 Jan; 14(1): 1–27.


原代的PBMC细胞经过激活后,使用gRNA和Cas9蛋白进行电转,并筛选出其中特别优化的gRNA,获得的MixClone 编辑的T细胞,经过扩增后进行蛋白和序列的检测,就可以进行抗表型的检测。(通过基因敲除研究抗HIV病毒的感染的表型)。

海星生物依据客户的需求设计和筛选不同基因功能的gRNA序列,并且可依据客户的需求设计和构建特定的基因筛选文库,并在PBMC细胞上进行验证和筛选,也可以在目的的细胞株上(Jurket和NK92等)进行验证。


3. CAR-T细胞体内/体外检测

体内外药效学实验是CAR-T临床转化前的重要基础,是保证CAR-T临床有效性和安全性的关键,海星生物致力于肿瘤免疫治疗技术的开发,建立了一整套的CAR-T体内外药效学实验平台。联合实验室拥有超过2000个笼位小鼠饲养动物房、拥有认证的P2生物安全实验室,可以为CAR-T的体内实验和体外实验提供技术支持,提供专业的CAR-T服务。


服务内容
1.CAR-T杀伤靶细胞的构建:构建携带目的靶分子的细胞株供CAR-T功能研究
2.CAR-T细胞杀伤活性动物体内验证
3.CAR-T细胞脱靶分析(基于原代细胞的验证)
4.CAR-T细胞激活检测CD69流式检测


服务特色

1.严格的实验室数据保存方案,实验数据具有可追述性 
2.除常规细胞株构建肿瘤外,我们可以根据项目需求构建与临床对应的基因修饰细胞株,全方面保证试验项目准确性 
3.联合实验室具备多种细胞株的小鼠成瘤经验,覆盖多种实体瘤和血液瘤
4.建设有基于多个胚层重要器官原代小的CAR-T体外脱靶分析服务

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CAR-T脱靶验证的原代细胞永生化的流程


技术服务流程

使用构建好的CAR-T细胞与不同来源的原代细胞进行共同孵育培养3day,并对细胞进行流式检测CD69,检测其中激活的CAR-T细胞的比例。该方案可以大幅的减少CAR-T细胞体内应用的脱靶风险。


4. 原代肿瘤细胞药物测试
海星生物致力于临床的医学机构和药物研究机构共同探索前沿的肿瘤抑制分子,我们可以按照不同的药物分子的靶点的要求,从临床收集不同来源的手术切除的肿瘤组织,并用胶原酶进行细胞分离,再用于后续的不同药物浓度的分析,可以依据客户临床获得的肿瘤组织构建起动物模型和细胞模型。


应用案例:

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脑肿瘤组织样本处理



友情链接: 国家实验细胞资源共享平台 ATCC Zhang Lab
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