|  骨髓间充质干细胞成骨诱导分化培养基试剂盒说明

MU005A6_BMHX-D101_成人骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

MU005A6_BMHX-D101R_成人骨髓间充质干细胞_成骨R_电子版.pdf

MU006A6_BMRS-D101_SD大鼠骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

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MU007A6_BMMC-D101_C57BL6小鼠骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

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MU011A6_BMRB-D101_兔骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

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MU012A6_BMDG-D101_犬骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

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MU008A6_BMMB-D101_Balbc小鼠骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

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MU009A6_BMRW-D101_Wistar大鼠骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

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MU010A6_BMRF-D101_F344大鼠骨髓间充质干细胞_成骨_电子版.pdf

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NOTE：间充质干细胞的成骨分化水平因细胞类型、细胞供体来源，培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。

|  举例说明：成骨诱导步骤

（以下步骤仅供参考，详情参见说明书）

1. 接种骨髓间充质干细胞：取对数生长期的细胞，按照2×10₄cells/cm₂的细胞密度接种至包被后的培养器皿中，于37℃，5% CO²培养环境下培养至汇合度60-70%，弃掉上清，加入成骨诱导分化培养基。

2. 细胞分化诱导：每2-3天更换成骨诱导培养基，于37℃，5% CO²培养环境下培养约14-21天，并注意观察细胞形态变化。根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况，决定终止细胞诱导的时间，进行染色鉴定。

3. 细胞固定：吸去培养基使用适量1×PBS清洗一次，弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面，室温固定30-60 min，弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。

4. 茜素红染色：加入适量茜素红染液染3~5min，吸去茜素红染液，用1×PBS清洗两次，并加入适量1×PBS避免细胞干燥。

5. 诱导评估：显微镜下观察成骨染色效果，并进行图像采集和诱导评估。诱导成功时，钙质结节会与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色。