|  骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基试剂盒说明

MU035A6_BMHX-D102_成人骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

MU035A6_BMHX-D102R_成人骨髓间充质干细胞_成脂R_电子版.pdf

MU037A6_BMMC-D102_C57BL6小鼠骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

MU037A6_BMMC-D102R_C57BL6小鼠骨髓间充质干细胞_成脂R_电子版.pdf

MU036A6_BMRS-D102_SD大鼠骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

MU036A6_BMRS-D102R_SD大鼠骨髓间充质干细胞_成脂R_电子版.pdf

MU041A6_BMRB-D102_兔骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

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MU042A6_BMDG-D102_犬骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

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MU038A6_BMMB-D102_Balbc小鼠骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

MU038A6_BMMB-D102R_Balbc小鼠骨髓间充质干细胞_成脂R_电子版.pdf

MU039A6_BMRW-D102_Wistar大鼠骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

MU039A6_BMRW-D102R_Wistar大鼠骨髓间充质干细胞_成脂R_电子版.pdf

MU040A6_BMRF-D102_F344大鼠骨髓间充质干细胞_成脂_电子版.pdf

MU040A6_BMRF-D102R_F344大鼠骨髓间充质干细胞_成脂R_电子版.pdf

NOTE：间充质干细胞的成骨分化水平因细胞类型、细胞供体来源，培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。

|  举例说明：成脂诱导步骤

（以下步骤仅供参考，详情参见说明书）

1.接种骨髓间充质干细胞：取对数生长期的细胞，按照2×10₄cells/cm₂的细胞密度接种至包被后的培养器皿中，于37℃，5% CO²培养环境下培养至汇合度90-100%，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基诱导液。

2. 细胞分化诱导：于37℃，5% CO²培养环境下培养约3天，更换为成脂诱导分化培养基维持液，培养1天后，再更换为成脂诱导分化培养基诱导液，继续培养3天。

按照以上换液频率诱导14-21天，并注意观察细胞形态变化。根据细胞诱导形成的脂滴数量和大小，决定终止细胞诱导的时间，并进行染色鉴定。

3. 细胞固定：吸去培养基,使用适量1×PBS清洗一次，弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面，室温固定30-60min，弃去固定液再使用1×PBS清洗两次。

4. 油红O染色：取生理盐水或1×PBS与油红O原液配制油红O工作液（油红O原液: 生理盐水=3:2），现用现配。

向清洗干净的诱导孔内加入适量工作液，静置染色30min；吸走油红O工作液，用1×PBS清洗两次，并加入适量1×PBS避免细胞干燥。

5. 诱导评估：显微镜下观察成脂染色效果，并进行图像采集和诱导评估；诱导成功时，脂滴会与油红O染料结合后呈现红色或橘红色。