Cas9X™

  • 腺病毒包装

腺病毒载体(Adenovirus)

能够携带大片段外源DNA、感染分裂细胞和非分裂细胞、诱导体液和细胞免疫应答(这对于疫苗开发是有益的)、表现出高效率的转导和高水平的转基因表达、不整合细胞DNA(在细胞内保持dsDNA游离体)。


服务类型:

我们提供第一代腺病毒(E1/E3-deleted Ad5)和嵌合型腺病毒(Chimeric adenovirus)包装服务。Ad5病毒的感染是通过病毒颗粒表面的纤突(Fiber)与细胞表面受体CAR(Coxsackie virus and adenovirus receptor)特异性结合而介导的。 并不是所有细胞都高表达CAR,Ad5病毒在某些不表达或者低表达CAR的细胞种类上的应用受限。我们开发了嵌合型腺病毒,它的感染是通过嵌合型纤突(Chimeric fiber)与细胞表面分子CD46特异性结合而介导的。


周期:

由于技术上的优势,我们的腺病毒包装具有更高的质量、更⾼效、更实惠。不同规格的腺病毒包装周期如下所示:

规格推荐使用滴度 & 体积*周期**
小规格细胞培养>1010 PFU/ml,10 x 25 ul,HBSS 缓冲液20-32天
中规格细胞培养>1010 PFU/ml,10 x 100 ul,HBSS 缓冲液20-32天
大规格细胞培养>1011 PFU/ml,10 x 100 ul,HBSS 缓冲液20-32天
大规格和超纯化动物体内>1012 VP/ml,10 x 100 ul,GTS 缓冲液22-36天


*我们的滴度保证仅适用于包装进病毒的区域(从5’ ITR 到3’ ITR)小于腺病毒承载限度(38.7 kb,~野生型HAd5基因组长度36 kb的108%)的载体。超过该范围,超出的那部分序列在包入衣壳时会被剪切掉,导致包装出来的腺病毒颗粒含有不完整的genome。此外,对于如下载体,我们同样不能保证滴度:

  • 包含对包装过程有不利影响的序列,例如毒性基因(如促凋亡基因);破坏包装细胞或病毒的完整性(如导致细胞聚集的膜蛋白)的基因 ;易于重排或者产生二级结构的序列(如重复序列或者高GC含量序列)。

  • ⽤户提供的载体,因为我们无法控制载体质量。

**周期是指订单接受到发货之间的时间。不包括需要客户提供任何物料(如病毒载体)的等待时间。

生产规格Unit Size滴度分装周期

腺病毒

⼩量制备

>2.5 x 1010 PFU>1 x 1010 PFU/ml10 x 25 ul4-5周

腺病毒

中量制备

>1 x 1010 PFU>1 x 1010 PFU/ml10 x 100 ul4-5周

腺病毒

大量制备

>1 x 1011 PFU>1 x 1011 PFU/ml10 x 100 ul4-5周

* 详情价格欢迎咨询。

* 慢病毒和腺相关病毒包装周期2-3周;超纯化增加1周;载体构建周期2-3周(ORF在2 Kb以内)
* 腺病毒包装周期是4-5周;超纯化增加1周;载体构建周期2-3周(ORF在2 Kb以内)

* ORF大于2 Kb的,载体构建部分的费用和周期适当调整


说明书

腺病毒使用说明书.pdf


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